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細(xì)菌生化培養(yǎng)箱的培育方法

更新時(shí)間:2017-07-19      點(diǎn)擊次數(shù):2130

細(xì)菌生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)應(yīng)根據(jù)細(xì)菌種類和目的等選擇培養(yǎng)方法、培養(yǎng)基,制定培養(yǎng)條件(溫度、pH值、時(shí)間,對(duì)氧的需求與否等)。一般操作步驟為先將標(biāo)本接種于固體培養(yǎng)基上,做分離培養(yǎng)。再進(jìn)一步對(duì)所得單個(gè)菌落進(jìn)行形態(tài)、生化及血清學(xué)反應(yīng)鑒定。培養(yǎng)基常用牛肉湯、蛋白胨、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細(xì)菌所需的特殊物質(zhì)配制成液體、半固體、固體等。一般細(xì)菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時(shí)生長(zhǎng)。厭氧菌則需在無氧環(huán)境中放2~3天后生長(zhǎng)。個(gè)別細(xì)菌如結(jié)核菌要培養(yǎng)1個(gè)月之久。

 

由于細(xì)菌無處不在,因此從制備培養(yǎng)基時(shí)開始,整個(gè)培養(yǎng)過程必須按無菌操作要求進(jìn)行,否則外界細(xì)菌污染標(biāo)本,會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果;而培養(yǎng)的致病菌一旦污染環(huán)境,就會(huì)引起交叉感染。

以疾病診斷為目的進(jìn)行的培養(yǎng),要選擇合適的標(biāo)本(血、尿、便、膿液、分泌物等),并應(yīng)結(jié)合臨床情況解釋所得結(jié)果。

 

以光合細(xì)菌培養(yǎng)方法為例。光合細(xì)菌培養(yǎng)的方法,按次序分為容器、工具的消毒,培養(yǎng)基的制備,接種和培養(yǎng)管理四個(gè)步驟。

(一)容器、工具的消毒參考、此處從略。

(二)培養(yǎng)基的制備

1.培養(yǎng)用水

如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是淡水種,菌種培養(yǎng)可用蒸餾水,生產(chǎn)培養(yǎng)可用消毒的自來水(或井水)配制。如果培養(yǎng)的光合細(xì)菌是海水種,則用天然海水配制培養(yǎng)基,注意在海水中加入磷元素時(shí),不能用磷酸氫二鉀,應(yīng)用磷酸二氫鉀,不然會(huì)產(chǎn)生大量沉淀。

2.滅菌和消毒菌種培養(yǎng)用的培養(yǎng)基應(yīng)連同培養(yǎng)容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產(chǎn)性培養(yǎng)可把配好的培養(yǎng)液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產(chǎn)性培養(yǎng)則把經(jīng)沉淀砂濾后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用。

3.培養(yǎng)基配制根據(jù)所培養(yǎng)種類的營養(yǎng)需要選擇合適的培養(yǎng)基配方。按培養(yǎng)基配方把所需物質(zhì)稱量,逐一溶解,混合,配成培養(yǎng)基。也可先配成母液,使用時(shí)按比例加入一定的量即可。

(三)接種培養(yǎng)基配好后,應(yīng)立即進(jìn)行接種。光合細(xì)菌生產(chǎn)性培養(yǎng)的按種量比較高,一般為20%~50%,即菌種母液量和新配培養(yǎng)液雖之比為1∶4~1∶1,不應(yīng)低于20%,尤其是微氣培養(yǎng),接種量更應(yīng)高些,否則光合細(xì)菌在培養(yǎng)液中很難占優(yōu)勢(shì),影響培養(yǎng)的zui終產(chǎn)量和質(zhì)量。

(四)培養(yǎng)管理光合細(xì)菌的培養(yǎng)過程中,管理工作包括日常管理操作和測(cè)試,生長(zhǎng)情況的觀察、檢查以及出現(xiàn)問題的分析處理等三個(gè)方面。

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